Научно-практический рецензируемый журнал

Клиническая и экспериментальная морфология

Особенности поражения легких при коинфекции ВИЧ/SARS-CoV-2 у пациентов с разной степенью иммунодефицита

2024-04-03T16:00:32+03:00

Введение. Развитие глобального пандемического процесса COVID-19 в условиях продолжающейся пандемии ВИЧ-инфекции поставило перед исследователями вопрос особенностей коинфекции SARS-CoV-2 и ВИЧ. В настоящем исследовании представлены морфологические изменения легочной ткани при коинфекции ВИЧ/SARS-CoV-2 у пациентов с разной степенью сохранности иммунного статуса.

Материалы и методы. В исследование включены шесть умерших ВИЧ-инфицированных пациентов с клиническим диагнозом «COVID-19», подтвержденным посмертно выявлением РНК SARS-CoV-2 в аутопсийных образцах легких методом полимеразной цепной реакции. Среди умерших три пациента с впервые выявленной ВИЧ-инфекцией и три пациента с контролируемой ВИЧ-инфекцией, получавших эффективную антиретровирусную терапию, и относительно сохранным иммунным статусом (CD4+ более 200 кл/мкл), без оппортунистических инфекционных заболеваний. При гистологическом исследовании было использовано гистохимическое окрашивание по ван Гизону, Грокотту, Цилю–Нильсену. ШИК-реакцию, иммуногистохимическое (ИГХ) исследование проводили с использованием антител против нуклеокапсида SARS-CoV-2 и цитомегаловируса.

Результаты. Макроскопическая картина во всех случаях характеризовалась снижением воздушности и уплотнением легочной ткани. Микроскопически поражение легких у пациентов с впервые выявленной ВИЧ-инфекцией было представлено картиной диффузного альвеолярного повреждения (ДАП) в сочетании с пневмоцистной пневмонией и цитомегаловирусной инфекцией. При ИГХ исследовании в легочной ткани этих умерших выявлена экспрессия нуклеокапсида SARS-CoV-2 в гиалиновых мембранах и альвеолоцитах. У пациентов с контролируемой ВИЧ-инфекцией зафиксированы проявления различных фаз ДАП и/или синдрома диссеминированного внутрисосудистого свертывания (ДВС-синдром) с преимущественным распределением SARS-CoV-2 при ИГХ исследовании в макрофагах и внутри сосудов.

Заключение. Поражение легких при глубоком ВИЧ-ассоциированном иммунодефиците определялось совокупностью прямого цитопатического действия коронавируса и патогенов-оппортунистов. При контролируемой ВИЧ-инфекции и относительно сохранном иммунном статусе сохраняются помимо прямого возможности иммуноопосредованного действия SARS-CoV-2 на легочную ткань с исходом в диффузное альвеолярное повреждение, что по морфологической картине сопоставимо с ВИЧ-негативными наблюдениями.

Ключевые слова: COVID-19, ВИЧ-инфекция, цитомегаловирус, пневмоциста, диффузное альвеолярное повреждение, сочетанное поражение легких

Клинико-морфологические особенности патологии миокарда и тромботической микроангиопатии у пациентов с COVID-19

2024-03-30T17:28:44+03:00

Введение. Патологические изменения в миокарде и признаки тромботической микроангиопатии (ТМА) при COVID-19 и сегодня остаются актуальной и малоизученной проблемой. Клинически диагностированный миокардит не всегда подтверждался на аутопсии. Целью настоящего исследования является комплексная оценка клинических и патоморфологических изменений в миокарде и ТМА у пациентов с COVID-19 во время четвертой инфекционной вспышки.

Материалы и методы. Проанализированы клинические и патологоанатомические данные 11 пациентов с COVID-19 с диагностированным миокардитом по результатам Эхо-КГ и ЭКГ: в семи случаях оценивались клинические показатели, а в пяти – проведено комплексное клинико-морфологическое аутопсийное исследование. Также проанализированы данные коагулограммы и количества тромбоцитов для оценки ТМА.

Результаты. При патологоанатомическом исследовании аутопсийного материала выявлена гипертрофия кардиомиоцитов с признаками миоцитолизиса. Гистохимическим окрашиванием по Маллори и по Ли, иммуногистохимическими (ИГХ) реакциями с антителами к CD3, CD4, CD8, CD20, CD45 и CD68, а также подсчетом лимфоцитов был подтвержден миокардит с лимфоцитарной инфильтрацией в строме миокарда с единичными полиморфноядерными лейкоцитами, наличием фиброзной ткани и присутствием поврежденных кардиомиоцитов.

Заключение. Золотым стандартом для объективной диагностики истинного миокардита являются магнитно-резонансная томография (МРТ) с применением контраста и эндомиокардиальная биопсия с ИГХ. Полученные нами морфологические данные в сопоставлении с клиническими показателями могут быть полезными как для прижизненной, так и постмортальной диагностики миокардита и тромботической микроангиопатии.

Ключевые слова: миокардит, новая коронавирусная инфекция, SARS-CoV-2, COVID-19, тромботическая микроангиопатия, патоморфология, ИГХ, ПЦР

Роль вируса папилломы человека в развитии эпителиальных опухолей молочной железы

2024-03-30T18:18:51+03:00

Введение. Этиологическим фактором развития гиперпластических процессов в эпителии молочной железы с формированием доброкачественной и злокачественной опухоли считают вирусную инфекцию. Вирус папилломы человека (ВПЧ) называют предполагаемой причиной развития рака молочной железы. Цель исследования – определить наличие белков E6 и L1 ВПЧ высокого онкогенного риска в опухолевых тканях молочной железы при доброкачественных и злокачественных процессах.

Материалы и методы. Выполнен ретроспективный анализ историй болезни 608 пациенток, оперированных по поводу внутрипротоковой папилломы (n=304) и по поводу других доброкачественных новообразований молочной железы (n=304), на сопряженность с последующим развитием рака молочной железы. Проведено иммуногистохимическое исследование на наличие белков раннего E6 ВПЧ типов 16, 18 и позднего L1 ВПЧ типов 1, 6, 11, 16, 18, 31 и показателя пролиферации Ki-67 в тканях доброкачественных и злокачественных эпителиальных опухолей молочной железы.

Результаты. Установлено повышение риска развития рака молочной железы в 2,3 раза для пациенток с внутрипротоковой папилломой в анамнезе. Большинство образцов с позитивной реакцией на белок Е6 обнаружено в группе опухолей с наличием структур внутрипротоковой папилломы, реакция на белок L1 отмечалась примерно в равном числе образцов во всех группах доброкачественных опухолей. Определена прямая умеренная корреляция между показателями синтеза белков Ki-67 и L1 (R=0,54; p=0,0057) при внутрипротоковой папилломе, указывающая на продуктивную инфекцию и возможное участие белка L1 в пролиферации эпителия данного типа опухолей. В образцах злокачественных новообразований и при доброкачественной пролиферации установлена слабая корреляция (R=0,47; p=0,0172) между Ki-67 и показателями E6, L1, что, вероятно, связано с отсутствием продуктивной инфекции в этих типах тканей.

Заключение. Исследование показало возможное участие белков E6, L1 вируса папилломы человека в развитии пролиферативных процессов в молочной железе. Внутрипротоковая папиллома в анамнезе пациенток повышает риск развития рака молочной железы. Изучение синтеза белков E6 и L1 в комплексе позволяет уточнить стадию жизненного цикла вируса папилломы человека, а сопряжение этих значений с показателем Ki-67 дает информацию о возможном риске прогрессирования доброкачественного процесса в злокачественный.

Ключевые слова: опухоль молочной железы, рак молочной железы, онковирусы, вирус папилломы человека (ВПЧ), внутрипротоковая папиллома

Динамика гиперхромных и MyoD-позитивных ядер регенерирующих скелетных мышц при инфракрасной фотомодуляции

2024-04-04T13:23:27+03:00

Введение. В настоящее время не существует методик, позволяющих в полной мере восстановить скелетную мышечную ткань после травмы. Инфракрасное лазерное воздействие является универсальным физиотерапевтическим фактором, используемым с целью активации пролиферации, увеличения активности ферментов, уменьшения воспаления и отека. При этом не изучено влияние времени экспозиции инфракрасного лазерного облучения на активацию миосателлитоцитов. Целью исследования являлся анализ влияния длительности инфракрасного лазерного облучения на состояние клеток камбиального резерва в регенерирующей скелетной мышечной ткани.

Материалы и методы. В эксперименте (128 самцов крыс Вистар) были сформированы четыре группы: 0 – интактный контроль; I (динамический контроль) – резаная рана m. gastrocnemius; II – лазерное облучение раны с экспозицией 60 секунд; III – лазерное облучение раны с экспозицией 180 секунд. Лазер применялся в непрерывном режиме, мощность 1,0 Вт. Проведено морфологическое исследование площади гиперхромных мышечных ядер и плотности расположения MyoD+ ядер на разных сроках эксперимента.

Результаты. В группе применения инфракрасного лазерного облучения с экспозицией 180 секунд площадь гиперхромных ядер в 1-е сутки снижалась, а на 7-е сутки была на 30% больше, чем в динамическом контроле. Плотность расположения MyoD+ ядер в группах с применением лазера увеличивалась по сравнению с динамическим контролем на сроке 3 суток вне зависимости от времени экспозиции, однако на 7-е сутки количество ядер было выше в группе с экспозицией 60 секунд.

Заключение. После применение инфракрасного лазера с экспозицией 60 секунд преимущественно повышается плотность расположения MyoD+ ядер, лазерное воздействие 180 секунд сильнее влияет на прирост площади гиперхромных ядер мышечной ткани.

Ключевые слова: скелетная мышечная ткань, регенерация, инфракрасный лазер, гиперхромные ядра, MyoD

Влияние п-тирозола на морфофункциональные изменения сосудов слизистой оболочки губы в условиях экспериментального стоматита

2024-03-30T18:31:37+03:00

Введение. Неспецифическим патогенетическим звеном воспалительных заболеваний слизистой оболочки полости рта является окислительный стресс, деструктивно влияющий на ее структуру и функцию. В связи с этим природные антиоксиданты, такие как п-тирозол, вызывают большой интерес у исследователей. Цель работы – изучение влияния п-тирозола на морфофункциональные изменения сосудов микроциркуляторного русла губы при экспериментальном стоматите.

Материалы и методы. Эксперименты выполнены на 72 крысах линии Вистар, у которых моделировали стоматит. Крыс поделили на четыре группы – контрольную (интактные животные) (n=18), с ожогом без лечения (n=18), с ожогом и последующей аппликацией п-тирозола (n=18), с ожогом и лечением (лидокаин + экстракт ромашки аптечной) (n=18).

Результаты. У животных с применением п-тирозола на 3-и, 7-е и 12-е сутки наблюдались наименьшие значения измененных сосудов, индекса перикапиллярной диффузии и индекса Керногана, а плотность неизмененных артериол, венул и капилляров была наибольшей. Выраженная экспрессия фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) выявлена у животных 3-й группы на 7-е и 12-е сутки и 4-й группы на 12-е.

Заключение. На фоне аппликации п-тирозола происходило усиление кровоснабжения в зоне репарации слизистой оболочки губы за счет увеличения плотности неизмененных микрососудов и, соответственно, объема крови, поступающей в область раны, а также из-за прорастания имеющихся в регионе сосудов и индуцирования неоангиогенеза.

Ключевые слова: п-тирозол, Родиола розовая, слизистая оболочка губы, ангиогенез, антиоксидант

Реакция Iba-1+ и CD68+ макрофагов печени лабораторных крыс на двухмесячное поступление водорастворимого кремния

2024-03-30T19:08:47+03:00

Введение. Соединения кремния широко используются в промышленном производстве, поэтому вероятность постоянного контакта человека с этим микроэлементом чрезвычайно высока. Изучение реакции макрофагов печени позволит получить новые данные об их возможном участии в воспалительном процессе, индуцированном поступающим с водой кремнием. Цель исследования – изучить реакцию Iba-1+ и CD68+ клеток печени лабораторных крыс на поступление кремния с питьевой водой в концентрации 10 мг/л в течение 2 месяцев.

Материалы и методы. Лабораторные крысы были разделены на две группы: контрольная (n=5) получала питьевую бутилированную воду ad libitum, опытная (n=5) – ту же самую воду, но с добавлением девятиводного метасиликата натрия (Na₂SiO₃× 9 H₂O) в концентрации 10 мг/л в пересчете на кремний, что соответствовало предельно допустимой, согласно СанПиН 2.1.4.1074-01 «Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды централизованных систем питьевого водоснабжения. Контроль качества», действующим на момент проведения исследования. Животные были выведены из эксперимента через 2 месяца. Печень извлечена и фиксирована в 10% нейтральном формалине и залита в парафин по стандартному протоколу. Для выявления Iba1+ и CD68+ структур использовали иммуногистохимический и иммунофлуоресцентный методы с применением специфических антител.

Результаты. Сравнительный анализ экспрессии двух маркеров макрофагов показал, что медиана площади Iba-1+ клеток в печени крыс опытной группы уменьшилась в 0,87 раза по сравнению с печенью крыс контрольной группы (р=0,000006). В печени крыс опытной группы возрастало количество как Iba-1+ (р=0,02), так и CD68+ клеток (р=0,01). Выявлены уменьшение интенсивности иммунофлуоресценции в Iba-1+ клетках печени крыс опытной группы (р=0,01) и увеличение ее в CD68+ клетках (р=0,27).

Заключение. Поступление водорастворимого кремния в концентрации 10 мг/л приводит к активации макрофагов печени за относительно небольшой срок воздействия (2 месяца). В связи с этим следует придать большее значение изучению вопроса безопасности соединений кремния в условиях их постоянного поступления.

Ключевые слова: кремний, водорастворимые силикаты, печень, СD68-позитивные клетки, Iba-1-позитивные клетки, макрофаги, М1-поляризованные макрофаги

Гиперплазия эндометрия: патогенетические лечебные подходы (экспериментальное исследование)

2024-04-04T13:24:24+03:00

Введение. Высокая частота встречаемости гиперплазии эндометрия, удобство ее моделирования и морфологической диагностики ставят важную задачу экспериментальной медицине по разработке способов ее патогенетической коррекции. Цель работы – провести комплексное иммуноморфологическое исследование при гиперплазии эндометрия на фоне избытка эстрогенов, подобрать патогенетическую терапию и оценить ее эффективность.

Материалы и методы. В исследовании использовали лабораторных крыс Вистар (n=45), которых разделили на контрольную (n=5) и экспериментальную (n=40) группы. Нами создана и морфологически верифицирована модель гиперплазии эндометрия при овариэктомии и трансдермальном введении эстрогенов. В экспериментальной группе выполнена коррекция индолом, мелоксикамом и полиоксидонием. При иммуногистохимическом изучении экспрессии маркеров пролиферации, апоптоза, различных пулов иммунных клеток, фактора роста сосудов были получены данные о механизмах развития гиперплазии.

Результаты. В данной модели иммунофенотипические изменения отличаются в отделах для вынашивания (рог матки) и изгнания плода (аналог шейки матки женщины). Выявлены разнонаправленные нарушения клеточного цикла эпителиоцитов и топографии иммунокомпетентных клеток. Мелоксикам нормализует большинство данных показателей – число иммунокомпетентных клеток, кинетику клеточных популяций, индол оказывает антиэстрогенный эффект, увеличивает экспрессию рецепторов к прогестерону, а полиоксидоний менее эффективен в коррекции гиперплазии эндометрия.

Заключение. Динамика экспрессии изученных маркеров может быть рекомендована для диагностики гиперплазии, а выявленные эффекты лекарственных препаратов для комплексной патогенетической терапии.

Ключевые слова: гиперплазия эндометрия, иммуноморфология, воспаление, диагностика, лечение

Оптимизация протокола макроскопического исследования почки после нефрэктомии при новообразовании

2024-03-30T19:06:59+03:00

Введение. Чаще показанием к нефрэктомии является опухоль почки. По данным литературы, при злокачественных новообразованиях могут развиваться паранеопластические гломерулопатии и нарушения обмена веществ, проявляющиеся в том числе нефропатиями. Наряду с этим гломерулопатии и нарушения обмена веществ могут быть не связаны с опухолью. Цель исследования – разработать методику макроскопического анализа препарата почки с опухолью, полученного после нефрэктомии, с забором материала для проведения иммунофлуоресцентной и электронной микроскопии.

Материалы и методы. Проанализирован 171 образец почки с опухолью после нефрэктомии с проведением эксперимента по определению оптимального расстояния для забора образцов паренхимы почки от опухоли.

Результаты. Представлен оптимизированный протокол макроскопического исследования препарата почки с опухолью, полученного после нефрэктомии. Оценено оптимальное расстояние от опухоли для забора образцов паренхимы почки (3 см).

Заключение. Гломерулопатии характеризуются двусторонним поражением независимо от происхождения. Протекая нередко бессимптомно или малосимптомно, они приводят к снижению функции почки. Таким образом, одномоментная диагностика гломерулярной патологии у пациентов с опухолью почки может стать единственной возможностью для диагностики гломерулопатий. Описанный метод позволяет достоверно диагностировать гломерулопатии у данной категории пациентов, что способствует своевременному назначению терапии и предотвращению быстрого прогрессирования заболевания.

Ключевые слова: почка, опухоль, гломерулопатии, операционный материал, макроскопическое исследование

Практический опыт применения цито-гистологической корреляции как способ обеспечения контроля качества исследований при диагностике патологии шейки матки

2024-03-30T19:00:35+03:00

Введение. В России в условиях проведения скрининга рака шейки матки при помощи цитологического метода исследования становится актуальной проблема контроля качества. При этом необходимо стандартизировать методику сопоставления результатов морфологических методов. Цель исследования – сопоставление результатов цитологических и гистологических исследований при диагностике патологии шейки матки с последующей классификацией несоответствий и расчетом показателей эффективности цитологического метода.

Материалы и методы. Проведен сравнительный ретроспективный анализ цитологического исследования с последующим гистологическим исследованием у 2739 пациенток.

Результаты. Совпадения обоих методов были определены в 57,9% случаев, незначительное несоответствие в 29%, значительное несоответствие в 13,1%. Чувствительность цитологического метода составила 79,3%, специфичность 77,6%, положительная прогностическая ценность 80%, отрицательная прогностическая ценность 76,9%. Число истинно положительных результатов статистически значимо было выше при использовании метода жидкостной цитологии, в то время как число ложно отрицательных результатов оказалось ниже по сравнению с традиционным методом. Наибольший процент истинно положительных результатов и наименьший ложно отрицательных выявлен при интервале между цитологическим и гистологическим исследованием до 2 месяцев.

Заключение. Сопоставление результатов морфологических методов – наилучший вариант обеспечения контроля качества. Это должен быть задокументированный и регламентированный протокол с последующим пересмотром препаратов при наличии расхождений и анализом причин несоответствий, а также расчетом эффективности метода.

Ключевые слова: цито-гистологическое сопоставление, интраэпителиальное поражение шейки матки, рак шейки матки, цервикальный скрининг, контроль качества

Научно-практический рецензируемый журнал Клиническая и экспериментальная морфология