Применение срезов органных внеклеточных матриксов для 3D культивирования

А.Ю. Пульвер; Б.Е. Лейбович; Р.А. Полтавцева; Г.А. Давыдова; А.Н. Шевцов; И.И. Селезнева; С.В. Павлович; Н.А. Пульвер; Е.А. Раскина; А.В. Волков; А.С. Сундеев; С.Г. Путилин; И.В. Савинцева; Г.Т. Сухих

doi:10.31088/2226-5988-2019-30-2-55-63

А.Ю. Пульвер НПО ООО «Институт биологии старения», Воронеж, Россия https://orcid.org/0000-0001-6673-1859
Б.Е. Лейбович НПО ООО «Институт биологии старения», Воронеж, Россия https://orcid.org/0000-0003-2259-7656
Р.А. Полтавцева ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России, Москва, Россия https://orcid.org/0000-0001-8625-9205
Г.А. Давыдова Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино Московской области, Россия https://orcid.org/0000-0003-4215-7084
А.Н. Шевцов НПО ООО «Институт биологии старения», Воронеж, Россия https://orcid.org/0000-0001-8641-2847
И.И. Селезнева ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России, Москва, Россия; Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино Московской области, Россия https://orcid.org/0000-0003-0316-9883
С.В. Павлович ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России, Москва, Россия https://orcid.org/0000-0002-1313-7079
Н.А. Пульвер НПО ООО «Институт биологии старения», Воронеж, Россия https://orcid.org/0000-0003-4549-5476
Е.А. Раскина НПО ООО «Институт биологии старения», Воронеж, Россия https://orcid.org/0000-0002-2195-4116
А.В. Волков НПО ООО «Институт биологии старения», Воронеж, Россия https://orcid.org/0000-0002-1030-5073
А.С. Сундеев НПО ООО «Институт биологии старения», Воронеж, Россия https://orcid.org/0000-0002-3846-2046
С.Г. Путилин НПО ООО «Институт биологии старения», Воронеж, Россия https://orcid.org/0000-0001-7104-2599
И.В. Савинцева Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино Московской области, Россия https://orcid.org/0000-0002-4162-0375
Г.Т. Сухих ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России, Москва, Россия https://orcid.org/0000-0002-7712-1260

DOI: https://doi.org/10.31088/2226-5988-2019-30-2-55-63

Аннотация

Актуальность: в последние десятилетия децеллюляризация органов стала устоявшейся техникой в области регенеративной медицины для получения сложных биоскаффолдов. Кроме того, in vitro было продемонстрировано, что таковые сохраняют свою природную тканеспецифичность.

Цель исследования: разработка методики получения срезов внеклеточных матриксов матки и яичников человека.

Материалы и методы: срезы внеклеточных матриксов матки и яичников человека толщиной 50 мкм были получены на криомикротоме, после чего проходили последовательную обработку детергентами (1% раствор додецилсульфата натрия) и 10% эмбриональной телячьей сывороткой для удаления резидуальной ДНК и лиофильную вакуумную сушку с последующей патоморфологической оценкой сохранности и качества срезов после лиофилизации и оценкой влияния на жизнеспособность подселяемых клеток посредством заселения клеточными культурами.

Результаты: описан способ получения полноценных тканеспецифичных субстратов для роста трехмерных клеточных культур большой плотности in vitro.

Выводы: разработанная методика получения срезов может быть применена для удобной и недорогой замены широко использующихся в фармакологии и токсикологии прецизионных срезов тканей.

Ключевые слова: 3D клеточные культуры, внеклеточный матрикс, гинекология и репродуктивная медицина, мезенхимальные мультипотентные стромальные клетки, тканевая инженерия, эндометрий