Сравнительный анализ способов депигментации нативного ретинального пигментного эпителия и 3D культуры его клеток

Аннотация

Введение. Разработка методов терапии заболеваний ретинального пигментного эпителия, в том числе трансплантации клеток, требует строгого подхода к морфологическому анализу данных. Основополагающим препятствием для иммуногистохимического исследования и микроскопии является наличие меланина, что актуализирует поиск оптимального метода депигментации, сохраняющего структуру клеток. Самым эффективным методом депигментации является протокол № 4. Цель исследования – провести сравнительный анализ методов депигментации нативных препаратов и 3D сфероидов ретинального пигментного эпителия для выявления наиболее эффективного и щадящего алгоритма.

Материалы и методы. Исследовано влияние различных депигментирующих агентов на образцы ретинального пигментного эпителия. Критериями оценки служили степень удаления меланина, сохранность клеточной морфологии, уровень аутофлуоресценции и сроки проведения методик.

Результаты. На основании комплексной оценки определены оптимальные протоколы химической депигментации для последующей конфокальной, световой и фазово-контрастной микроскопии.

Заключение. Разработаны предпочтительные алгоритмы депигментации, обеспечивающие морфофункциональную сохранность ретинального пигментного эпителия и пригодные для детального микроскопического анализа, что формирует основу для стандартизации исследований в данной области.

Ключевые слова: ретинальный пигментный эпителий, морфологическое исследование ретинального пигментного эпителия, депигментация ретинального пигментного эпителия, возрастная макулярная дегенерация, морфологическое исследование 3D сфероидов